高中生物必修1叶绿体色素的提取和分离实验知识点
“叶绿体中色素的提取和分离”是高中生物教材中的一个关键实验,有哪些知识点需要掌握?下面是小编给大家带来的高中生物必修1叶绿体色素的提取和分离实验知识点,希望对你有帮助。
高中生物必修1叶绿体色素的提取和分离实验知识点
1、原理:(1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇(或丙酮)中,所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。(2)不同的色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢,因而可用层析液将不同色素分离。
3、结果分析:①从色素带的宽度可知色素含量的多少依次为:叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素; ②从色素带的位置可知色素在层析夜中溶解度大小依次是:胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a>叶绿素b; ③在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a 与叶绿素b ,距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。
4、注意事项:(1)裁取定性滤纸时,注意双手尽量不要接触纸面,以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 (2)根据烧杯的高度制备滤纸条,让滤纸条长度高出烧杯1cm ,高出的部分做直角弯折。
(3)画滤液细线时,用力要均匀,速度要适中。
(4)研磨要迅速、充分。a.因为丙酮容易挥发;b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的色素;
c.叶绿素极不稳定,能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。
(5)制备滤纸条时,要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果。
5、实验创新:在本实验中在圆形滤纸中央点上叶绿体色素的提取液进行层析,会得到近似同心的四个色素环,由内到外依次是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。
高中生物必修1叶绿体色素的提取和分离实验常见问题
一、 为什么要选新鲜绿色的幼嫩叶片?
因为叶绿色含N﹑Mg,而老叶中这两种矿质元素很多已经分解转移,所以鲜绿色的幼叶中叶绿素的含量高,适合于实验.
二、 制备滤纸条要剪去两角
实验中需将滤纸条的一端剪去两角,为什么这样做,如果不会怎么样呢? 原来若不剪去滤纸条的两角,色素带的两边和中间不是在一条直线上。这是由于滤纸条两边水分子可以向三个方向散失,向上“跑”的速度快。而滤纸条中间的水分子只能向两个方向散失,分别是向内和向外,因而会“跑”得慢一些。而现在剪去滤纸条的两个角,可以在一定程度上加快中间色素的扩散速 度,减慢两边色素的扩散速度,从而真正意义上使这些色素从同一起点随层析液扩散.
三、为什么研磨时加无水乙醇或丙酮?
因为色素是有机物,根据相似相容性原理,无水乙醇或丙酮能溶解色素
四、为什么加入少许二氧化硅?
在提取色素的过程中,要加人少许二氧化硅。原来是为了研磨得充分。二氧化硅就是石英沙子,研磨时可以增大强度,加快细胞和叶绿体的破裂,而使叶绿体中的色素释放出来。
五、为什么加入少许碳酸钙?
在提取色素的过程中,要加人少许碳酸钙。原来是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。叶绿体中的色素原本所处的环境具微碱性。在实验中,研磨会使细胞结构遭到破坏,细胞液中有机酸流出,酸性的细胞液就会接触到叶绿体中的色素,致使叶绿素的分子结构遭到破坏,使叶绿素失镁,呈黄褐色,如同我们看到到腌制的黄瓜会变色一样,而碳酸钙是强碱弱酸盐,碳酸钙在水中的溶解度很小,但还是有一部分得到溶解,中和细胞液的酸性,制造了一个弱碱环境,保护了色素。
六、为什么用单层尼龙布过滤?
在过滤时,漏斗基部放一块单层尼龙布,老教材中是用滤纸来过滤的。过滤的目的是去掉不需要的杂质如破碎的细胞、二氧化硅、碳酸钙等,相对而言,单层尼龙布可以让色素溶液更好地通过效果比滤纸要好。
高中生物必修1实验知识点
1、还原糖的检测
(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。
(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。
(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)
★模拟尿糖的检测
1、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸
3、结果:(用斐林试剂检测)试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析:因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。
2、脂肪的检测
(1)材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。
(2)步骤: 制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
3、蛋白质的检测
(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)
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