高二下册生物菊花的组织培养实验操作过程
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高二下册生物菊花的组织培养实验操作过程
一、制备MS固体培养基
实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备
1、配制各种母液。
配制母液时,大量元素浓缩 ,微量元素浓缩 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。
2、配制培养基。
配制1LMS培养基时,先将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水,加热使琼脂熔化,然后加入蔗糖30g,去配制好的母液,依次加入,然后定容至1000mL。调节pH值,然后分装到锥形瓶中,每瓶分装50或100mL
3、灭菌。高压蒸汽灭菌
二、外植体消毒
选取菊花茎段时,要取 。
无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑_______________;另一方面还要考虑植物材料的__________。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,真菌污染可能是_________灭菌不当。
三、接种
接种前,用体积分数70%的酒精将工作台擦拭,然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行,并且每次使用器械后,都要用火焰灼烧灭菌
四、培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间定期消毒,温度控制在18-22℃,并且每天用日光灯光照12h
五、移栽
移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日,然后用清水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤中
六、栽培
每天要观察记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花
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